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    重組賴(lài)氨酰內切酶(質(zhì)譜級)
    日期:2018-08-08    瀏覽次數:次

    重組賴(lài)氨酰內切酶(質(zhì)譜級)


    產(chǎn)品簡(jiǎn)介

    賴(lài)氨酰內切酶(Lysyl Edopeptidase)又稱(chēng)賴(lài)氨酰肽鏈內切酶Lys-C 內切酶,是一種絲氨酸蛋白酶, 蕞.初由Masaki等人從土壤細.菌中發(fā)現并分離得到。該酶具有高度特異性,可特異性切割賴(lài)氨酸殘基和 S-氨乙 基半胱氨酸殘基羧基端的肽鍵。也有報道稱(chēng)具有微量的非特異性切割。該酶是蛋白質(zhì)序列分析和生物制品生產(chǎn) 中非常珍貴的工具酶。該酶可單獨使用,也可以與其它蛋白酶一起使用,經(jīng)過(guò)消化的蛋白可用于肽圖譜分析以 及目的蛋白的制備。 本品是從重組大腸桿菌中分離純化,再經(jīng)冷凍干燥得到的重組賴(lài)氨酰內切酶粉末。

    本品屬于生物化學(xué)級別 的基.因工程酶,不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑.制.劑,具有天.然賴(lài)氨酰內切酶相同的活.力和特異性。



    產(chǎn)品優(yōu)勢

    無(wú)動(dòng)物源性:無(wú)動(dòng)物病.毒、無(wú)致病物質(zhì)、無(wú)外源因子污染,安.全性高。 

    純度高:比活高;宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。 

    生產(chǎn)規模 1000L 以上。 

    合規性:生產(chǎn)設備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規要求,符合 GMP 指導原則。 

    ? 質(zhì)量文件完整:按客戶(hù)需求,可提供相關(guān)法規支持文件。



    - 產(chǎn)品特性


    性狀

    白色或類(lèi)白色凍 干粉

    等電點(diǎn)

    6.9-7.0

    分子量為 29.2 kD±2.9kD 的單一主帶(SDS-PAGE)

    蕞佳pH 8.5-9.5

    溶解性

    在緩沖液中可溶

    比活.性 不得少于 1.0 AU/mg pro. 

    酶活定義:30℃, pH9.5 條件下,每分鐘催化底物生成 1μmol 對硝基苯胺的酶量為 1AU。




    產(chǎn)品用途

    ? 酶抑.制.劑:本品不含 DFP,PMSF,TLCK 等酶抑.制.劑。


    - 反應規程

    【蛋白質(zhì)的準備 】

    將蛋白質(zhì)溶解在 25mM Tris-HCl,pH9.2 的溶液中。溶解性低或者需要變性處理的蛋白質(zhì)可以用蕞.小體積的 變性劑,如 8M 尿素或 6M 鹽.酸胍,在室溫~37℃條件下孵育 1h 使之溶解。需要做二硫鍵還原處理的蛋白質(zhì) 可以加入終濃度為 5mM 的 DTT 或β-巰基乙.醇,于 50~60℃孵育 20 分鐘使之溶解。調整反應溶液體積使 Tris-HCl 為 25mM,尿素為 1M 或更低,鹽.酸胍為 0.1M 或更低。 

    【酶液準備 】

    稱(chēng)取所需的酶粉,用適量緩沖液溶解即得。 

    【消化反應 】

    1g 多肽或蛋白質(zhì)推薦酶的用量在 1~100AU 之間。推薦于-25~37℃反應 2~18h。 

    如果需要終止反應,可以加入乙酸或鹽.酸調節 pH 至酸性。 

    【注意】 為了獲得蕞.佳的酶切效果,通常需要蛋白處于可溶、變性和二硫鍵還原的狀態(tài),否則需要加大酶用量。應嚴格控制鹽.酸胍和尿素的加入量,尿素高于 1M 或鹽.酸胍高于 0.1M 將會(huì )降低重組賴(lài)氨酰內切酶得活.力。


    - 運輸和儲存穩定性

    運輸穩定性:冰袋保溫運輸,活.性穩定。 

    儲存穩定性:凍 干粉在-15~-20℃條件下至少能穩定存放24個(gè)月。1mM鹽.酸或50mM醋酸溶解后儲存于-15~-20℃,反復凍融10次,無(wú)活.性損失。溶解后 2~8℃保存建議不超過(guò)7天 ,溶解后-15~-20℃ 保存建議不超過(guò)30天 。


    - 注意事項和免責聲明

    ? 溫度超過(guò) 37℃本品可能發(fā)生自我消化。在 2M 尿素或 0.1%SDS可保留大部分活.力。

    ? 本品具有吸潮性,應室溫平衡后再取用。

    ? 本品不得用于臨床診斷和治.療。


    說(shuō)明:由于廣告法的緣故,部分違禁詞用同音字替換或使用符號來(lái)間隔,如有疑問(wèn)可以聯(lián)系我們提供詳細的產(chǎn)品信息。

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